潔凈廠房的沉降菌標準原理：采用沉降法，即通過于培養(yǎng)皿中利用自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子，經不少于48小時的培養(yǎng)，在30—35℃下讓其繁殖到可見的菌落進行計數，以菌落數來判定潔凈環(huán)境內的活微生物數，并以此來評定潔凈室(區(qū))的潔凈度。

　　潔凈廠房沉降菌標準主體內容：

　　1. 器材：

　　高壓消毒鍋：使用時嚴格按照說明書操作。

　　恒溫培養(yǎng)箱：必須定期對培養(yǎng)箱的溫度計進行檢定。

　　培養(yǎng)皿：Φ90mm玻璃培養(yǎng)皿

　　培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂

　　2. 操作程序

　　2.1 采樣

　　將已制備好的培養(yǎng)平皿按要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露0.5小時，再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。

　　2.2 培養(yǎng)：

　　2.2.1 全部采樣結束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　2.2.2 在30~35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時間不少于48小時。

　　2.2.3 每批培養(yǎng)基應有對照實驗，檢驗培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿做對照實驗。

　　2.3 菌落記數

　　2.3.1用肉眼直接計數，標記或在菌落計數器上點計，然后用5~10倍放大鏡檢查，是否有遺漏。

　　2.3.2 若培養(yǎng)皿上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數。

　　2.4 注意事項

　　2.4.1 測試用具要做滅菌處理，以確保測試的可靠性、正確性。

　　2.4.2 采取一切措施防止人為對樣本的污染。

　　2.4.3 對培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數做詳細的記錄。

　　2.4.4 由于細菌種類繁多，差別甚大，計數時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，須注意細菌菌落與培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。

　　2.4.5 采樣前應仔細檢查每個培養(yǎng)皿的質量，如發(fā)現變質、破損或污染的應剔除。

　　3. 測試規(guī)則

　　3.1 測試狀態(tài)

　　3.1.1 沉降菌測試前，被測試潔凈室(區(qū))的溫濕度須達到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數、空氣流速必須控制在規(guī)定值內。

　　3.1.2 沉降菌測試前，被測試潔凈室(區(qū))已經過消毒。

　　4.1.3 測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，測試狀態(tài)的選擇必須符合生產要求，并在報告中注明測試狀態(tài)。

　　3.2 測試人員

　　3.2.1 測試人員必須穿戴符合環(huán)境潔凈級別的工作服。

　　3.2.2 靜態(tài)測試時，室內測試人員不得多于二人。

　　3.3 測試時間

　　3.3.1 對單向流，如100級凈化房間及層流工作臺，測試應在凈化空調系統正常運行不少于10分鐘后開始。

　　3.3.2 對非單向流，如10,000級，100,000級以上的凈化房間，測試應在凈化空調系統正常運行不少于30分鐘后開始。

　　3.4 沉降菌計數

　　3.4.1 采樣點數目及其布置

　　潔凈廠房沉降菌測試的最少采樣點數目可查表1確定。在滿足最少測點數的同時，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數。

　　3.5.2 采樣點的位置

　　3.5.2.1工作區(qū)采樣點的位置離地0.8~1.5m左右(略高于工作面)。

　　3.5.2.2 可在關鍵設備或關鍵工作活動范圍處增加采樣點。

　　3.6 記錄：測試報告中應記錄房間溫度、相對濕度及測試狀態(tài)。

　　3.7 結果計算

　　3.7.1 用計數方法得出各個培養(yǎng)皿的菌落數.

　　3.7.2平均菌落數的計算：

　　平均菌落數=(M1+M2+…Mn)/n

　　式中： M1 — 1號培養(yǎng)皿菌落數

　　M2 — 2號培養(yǎng)皿菌落數

　　Mn — n號培養(yǎng)皿菌落數

　　n — 培養(yǎng)皿總數。

　　3.8 結果判定

　　潔凈廠房的沉降菌標準用平均菌落數判斷潔凈室(區(qū))空氣中的微生物數。

　　3.8.1潔凈室(區(qū))內的平均菌落數必須低于所選定的評定標準。

　　3.8.2若某潔凈室(區(qū))內的平均菌落數超過評定標準，則必須對此區(qū)域先進行消毒，然后重新采樣兩次，測試結果均需合格。

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